Proyecto de investigación:
Caracterización de biomarcadores y marcadores genéticos en la búsqueda del diseño de una prueba de diagnóstico temprano de la enfermedad de Parkinson específica para población mexicana.

Nombre del investigador responsable:
Ada Agustina Sandoval Carrillo
Área de conocimiento:
Ciencias de la salud
Disciplina:
Investigación de la salud
Fecha en que inicia el proyecto:
2 de febrero, 2015
Fecha en que termina el proyecto:
8 de enero, 2017
Tipo de financiamiento con que se realiza el proyecto:
Externo (otorgado por alguna institución distinta a la UJED).
Fuente de financiamiento:
CONACyT
Nombre de la convocatoria mediante la cual se obtuvo el apoyo (nombre, tipo y año).
Fondo sectorial de investigación en salud y seguridad social SS/IMSS/ISSTE-CONACYT 2014. S0008-2014-1.

Información del protocolo

Protocolo

La enfermedad de Parkinson (EP), es uno de los trastornos neurodegenerativos más frecuentes y mejor estudiados. Clínicamente se caracteriza por escasez y lentitud de movimientos (bradicinesia), aumento del tono muscular (rigidez), rostro inexpresivo y un temblor característico (4 o 5 por segundo) en reposo. También destaca, la marcha festinante (arrastrando los pies), así como una postura flexionada y un equilibrio inestable. A medida que los síntomas empeoran, las personas con la enfermedad pueden tener dificultades para caminar o hacer labores simples. También pueden tener problemas como depresión, trastornos del sueño o dificultades para masticar, tragar o hablar.

Los defectos en la función motora se deben a una degeneración progresiva de las neuronas dopaminérgicas de la sustancia nigra pars compacta (SNc), una población de neuronas en el mesencéfalo que se proyectan hacia sus blancos en el estriado, principalmente el núcleo caudado y putamen, por lo que su muerte representa un déficit de dopamina en estas estructuras. En algunas neuronas que sobreviven, se observan inclusiones citoplasmáticas eosinófilas llamadas cuerpos de Lewy, formados por ubiquitina y alfa-sinucleína. En México, se ha reportado una prevalencia de entre 40 a 50 casos por cada 100,000 habitantes al año. Aunque no se conocen las cifras exactas, se estima que alrededor de 500,000 personas padecen de EP en nuestro país. En el Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía y otros hospitales de alta especialidad, es la cuarta causa de consulta neurológica. La organización mundial de la salud (OMS) ha calculado que en el mundo, debido al aumento de la tasa de sobrevida, la enfermedad de Parkinson afecta actualmente entre 4.1 a 4.6 millones de personas mayores de 50 años. Se calcula que para el año 2030 esta cifra será duplicada, por lo que se considera ya un problema de salud pública.

Actualmente el diagnóstico de la EP se basa principalmente en criterios clínicos y el estado y evolución de la EP se basa en la examinación de los síntomas mediante el uso de sistemas de puntuación estructurados (UPDRS, SCOPA y H & Y).
Debido a la naturaleza de la enfermedad, diversos grupos de investigación han propuesto y analizado biomarcadores en muestras periféricas (líquido cefaloraquidio, sangre y orina) encontrando un promisorio potencial para el diagnóstico y detección temprana de la EP. Diversos reportes indican que los tejidos periféricos como la sangre presentan una significativa similaridad en los perfiles de expresión génica al compararlos con los inaccesibles tejidos del sistema nervioso central ofreciendo una valiosa alternativa para el estudio de marcadores en trastornos neuropsiquiátricos. En el 2012 Molochnikov y cols. realizaron un estudio multicentrico en población Europea en el que analizaron la expresión de un grupo de 5 genes en muestras de sangre de pacientes con EP. Los genes analizados fueron ALDH1A1, PSMC4, SKP1A, HSPA8 y UBE2K. Los resultados que obtuvieron demostraron la capacidad de este grupo de 5 genes de diagnosticar la EP temprana/leve, con un posible valor diagnóstico para la detección de la EP asintomática antes de la expresión manifiesta de la enfermedad en la población estudiada. Además de estos 5 genes, el gen de SNCA que codifica para la alfa-sinucleína ha sido ampliamente estudiado y en muchos casos demostrado su posible aplicación como biomarcador, tanto a nivel de expresión del gen como de la proteína misma. En este proyecto se propone la realización de un estudio multicéntrico (Hospital General Manuel Gea González, Hospital General Ajusco Medio y Hospital General de Durango) de 30 meses divididos en 3 etapas en el que a través de un estudio de casos y controles se evaluarán biomarcadores y marcadores genéticos cuyo potencial diagnostico ha sido descrito exitosamente en otras poblaciones, situación por la que se vuelve necesario su análisis en población mexicana con la finalidad de dilucidar la participación de cada uno de estos marcadores en los mecanismos fisiopatogénicos de la neurodegeneración nigroestrial, a partir de un estudio demostrativo, con un tamaño muestral amplio (150 casos y 150 controles) y representativo de la población mexicana que resuelva las dudas no resueltas con la evidencia actual.

Objetivo general

Caracterizar biomarcadores y marcadores genéticos en pacientes con enfermedad de Parkinson.

Objetivos específicos

  1. Cuantificar la expresión de los genes ALDH1A1, PSMC4, SKP1A, HSPA8, UBE2K, SNCA, GAPDH, ACTB y ALAS1 en pacientes con EP y en pacientes sanos.

  2. Cuantificar los niveles de alfa -sinucleina y alfa-sinucleina fosforilada en pacientes con EP y en pacientes sanos.
  3. Determinar si existe asociación entre los niveles de expresión de los genes ALDH1A1, PSMC4, SKP1A, HSPA8, UBE2K, SNCA y la EP.

  4. Determinar si existe asociación entre los niveles de expresión de SNCA y de alfa-sinucleina y alfa-sinucleina fosforilada.
  5. Determinar si existe asociación entre los niveles alfa-sinucleina y alfa-sinucleina fosforilada y la enfermedad de EP.

  6. Determinar el valor diagnóstico de los marcadores evaluados.

Metas propuestas

  1. Fortalecer el equipamiento del laboratorio de investigación.

  2. Incorporar 1 estudiante de Maestría, 1 estudiante de Doctorado y 1 estudiante de Licenciatura.

  3. Capacitar al personal participante.

  4. Estandarizar las técnicas de laboratorio.

  5. Iniciar la integración de los grupos (30%), toma de muestras biológicas y síntesis de cDNA para iniciar la caracterización de la expresión de uno de los genes propuestos.

  6. Evaluar el avance del proyecto.

  7. Incorporar a 2 nuevos estudiantes de licenciatura y 2 de maestría.

  8. Continuar con la integración de los grupos (85% para el grupo 1 y 2 y 100% para el grupo 3), toma de muestras biológicas.

  9. Continuar con extracciones de RNA y síntesis de cDNA.

  10. Continuar con los análisis de expresión.

  11. Estandarizar e iniciar los experimentos de cuantificación de las proteínas de interés.

  12. Se contará con el 100% de individuos de los grupos 1 y 2. Se contará con el 100% de muestras analizadas en los experimentos de expresión, cuantificación de alfa sinucleina y de alfasinucleína fosforilada. Se contará con el 100% de los cuestionarios aplicados. Se contará con la base de datos del proyecto al 100%.de los análisis de expresión. Se contará con el 100%.

Fuente de la información

Dirección de Posgrado e Investigación


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